Pierce™ SDS-PAGE Sample Prep Kit
Lieferant: Thermo Fisher Scientific
Das Pierce SDS-PAGE-Probenvorbereitungskit entfernt schnell und einfach große Mengen an Salzen, Denaturierungsmitteln, Detergenzien und anderen Pufferkomponenten, die die Polyacrylamid-Gelelektrophorese von Proteinen beeinträchtigen.
- Entfernt Farbstoffe, Reduktionsmittel, Detergenzien, Zucker, Glycerin, Guanidin, Harnstoff und Ammoniumsulfat, um reproduzierbare Ergebnisse bei der SDS-PAGE-Analyse zu liefern
- Kompatibel mit dem BCA-Proteinassay, ermöglicht die Proteinquantifizierung der verarbeiteten Probe vor dem Gelladen
- Konzentriert Proteinproben für die SDS-PAGE-Analyse in weniger als 20 Minuten um das Sechsfache
Dieses Kit bietet eine einfache und effektive Methode zum Konzentrieren von Proben und entfernt gleichzeitig Chemikalien, die die SDS-PAGE-Analyse beeinträchtigen, wie Säuren und Basen, Detergenzien, Guanidin und Ammoniumsulfat. Das proprietäre PAGE-Prep-Harz bindet Protein in Gegenwart von Dimethylsulfoxid (DMSO). Anschließend werden störende Verunreinigungen durch Waschen des proteingebundenen Harzes in einem einfach zu verwendenden Schleuderbecher-Format entfernt. Proteine werden in einem Puffer eluiert, der mit dem Pierce BCA-Proteinassay kompatibel ist, was die Quantifizierung eines Teils der verarbeiteten Probe ermöglicht. Die eluierten Proteine können dann mit Probenpuffer kombiniert und auf dem SDS-PAGE-System Ihrer Wahl analysiert werden.
Wird für in Guanidin·HCl gelöste Einschlusskörper, Proben mit Puffern mit niedrigem pH-Wert, Thiocyanate oder Harnstoff, in Ammoniumsulfat gefällte Proteine und die Konzentration verdünnter Proteinlösungen verwendet.
Dieses Kit verwendet ein einzigartiges Harz aus modifizierter Kieselgur, das Protein in Gegenwart von DMSO bindet. Das einfache Protokoll umfasst die Kombination von 2 bis 350 µl Probe, die bis zu 70 µg Protein enthält, mit 20 µl des PAGEprep-Harzes in DMSO (im Lieferumfang enthalten). Proteine in der Probe binden innerhalb von 3 bis 5 Minuten an das Harz, woraufhin die nicht gebundenen kontaminierenden Chemikalien abgewaschen werden. Abschließend werden die gereinigten Proteine in 50 µl Elutionspuffer aus dem Harz gewonnen. Die gewonnene Proteinprobe kann dann mit dem mitgelieferten 5X Probenladepuffer zum Gel-Laden (oder einem anderen Probenladepuffer) gemischt werden. Das Verfahren ermöglicht auch die Konzentration verdünnter Proteinproben um das Sechsfache, wodurch mehr Protein pro Vertiefung geladen werden kann.
Für eine zuverlässige SDS-PAGE-Analyse müssen Proteinproben in einem Puffer ohne störende Substanzen und in für die Analyse ausreichenden Proteinkonzentrationen vorbereitet werden. Viele störende Substanzen, die typische Probenpuffer für die Polyacrylamid-Gelelektrophorese (SDS-PAGE) stören, lassen sich mit herkömmlichen Probenvorbereitungsmethoden nur schwer entfernen. Glücklicherweise können Proben, die ein breites Spektrum an störenden Chemikalien enthalten, wie z. B. chaotrope Wirkstoffe, Reinigungsmittel, Lipide, extreme pH-Werte und Salze, mit diesem Kit innerhalb von Minuten gereinigt werden.
Bewahren Sie das Kit nach Erhalt bei Raumtemperatur auf.
Lieferumfang: Enthält PAGEprep-Harzaufschlämmung, DMSO-Lösung, Elutionspuffer, Probenladepuffer, Zentrifugenbecher und Sammelröhrchen.
Bitte beachten Nur für Forschungszwecke. Nicht zu Verwendung in Diagnoseanwendungen geeignet.
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