Antikörper-biotinylierungs-kit für IP, Pierce™
Lieferant: Thermo Fisher Scientific
Das Pierce™ Antikörper-Biotinylierungs-Kit für IP bietet Biotinylierungs-Reagenzien speziell für die Markierung von primären Antikörpern in Immunpräzipitations-Anwendungen.
- Anwenderfreundlich – die Kit-Konfiguration wurde speziell für die Aufnahme von 50 bis 200 μg Antikörpern in einer 100 μL-Reaktion optimiert
- Zeba™ Entsalzungssäulen werden mitgeliefert, die überschüssiges Biotinylierungs-Reagenz nach der Markierung entfernen
- Reagiert mit primären Aminen (-NH₂) von Antikörpern
- Pegylierung verbessert die Wasserlöslichkeit des biotinylierten Antikörpers und verhindert die Aggregation bei Lagerung
- Längerer Spacerarm (29 Ångström) minimiert die sterische Hinderung bei Bindung an Avidin-Moleküle
Die Reagenzien wurden für biotin-markierte Antikörper für IP- und Co-IP-Reaktionen optimiert und validiert. Die Bestimmung der optimalen Anzahl der Biotine, die an das Zielmolekül binden sollen, ist eine der größten Herausforderungen der Biotinylierung. Bei IP- und Co-IP-Anwendungen führt eine zu hohe Anzahl von Biotinen zur reduzierten Affinität für das Ziel-Antigen, während zu wenige Biotine zum Auslaugen der Antikörper nach der Elution des Ziel-Antigens führen. Der Biotin-Markierungsvorgang bei diesem Kit für IP wurde für diese Herausforderung entwickelt.
Das NHS-PEG4-Biotin-Markierungsreagenz enthält eine aminreaktive N-Hydroxysuccinimidester-(NHS-)Gruppe und einen wasserlöslichen PEG4-Spacer für die optimale Markierung. Sowohl die Markierungseffizienz des Biotinylierungs-Reagenz als auch die Bindungsaffinität des markierten Antikörpers wurden unter Anwendung von monoklonalen Maus- (IgG1, IgG2), polyklonalen Kaninchen- und monoklonalen Kaninchen-Antikörpern validiert.
Lieferumfang: Das Kit enthält EZ-Link NHS-PEG4-Biotin (8×0,5 mg), Zeba Spin Entsalzungssäulen (8×0,5 ml), 20X phosphatgepufferte Kochsalzlösung (15 ml).
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