Überblick über die Auswahl der richtigen Säule
Ausgangsstoffe
- Kieselgel ist der beliebteste Ausgangsstoff. Es verfügt über eine hohe physische Festigkeit und eine Oberfläche, die sich chemisch leicht modifizieren lässt, um Phasen für den Einsatz in einer Vielzahl von HPLC-Modi zu ermöglichen. Kieselgel löst sich jedoch in Wasser bei pH ≥6,5 auf, während gebundenes Kieselgel bei pH ≤2,5 instabil ist. Neuere gebundene Kieselgele haben einen erweiterten pH-Bereich von 2 - 10 oder höher. Zu den neueren Innovationen gehören der TYP-C™-Kieselgelbereich, in dem die Kieselgeloberfläche mit einer Schicht Siliciumhydrid modifiziert wird.
- Polymerwerkstoffe weisen nur minimale pH-Einschränkungen auf, sind jedoch physikalisch weniger stabil und weisen eine geringere Trennungseffizienz als Kieselgel für kleine Moleküle auf. Für große Moleküle wie Proteine oder synthetische Polymere ist ihre Leistung mit der von auf Kieselgel basierenden Materialien vergleichbar.
- Graphitisierter Kohlenstoff hat eine hohe Festigkeit und hervorragende pH-Stabilität, kann aber nicht modifiziert werden. Er kann teuer sein und eignet sich am besten für einzigartige Selektivitätsanwendungen.
- Zirkoniumoxid (ZrO2) bietet eine einzigartige Selektivität in Kombination mit extremer chemischer und thermischer Stabilität (bis zu 200 °C).
- Titanoxid (TiO2) ist in einem breiten pH-Bereich und bei hohen Temperaturen stabil. Im Gegensatz zu Kieselgel ist die Oberfläche von Titanoxid alkalisch. Dies kann bei der Analyse von basischen Wirkstoffen nützlich sein, aber die Trennungseffizienz ist in der Regel geringer.
- Aluminiumoxid hat eine höhere pH-Stabilität als Kieselgel, lässt sich aber chemisch nicht leicht modifizieren.
Trennverfahren
Einfach ausgedrückt wird die Auswahl des geeigneten Chromatographie-Trennungsmodus durch die Molekülgröße und Polarität der gelösten Stoffe bestimmt. Es folgt ein Leitfaden für die Auswahl. Bei einigen Molekülen ist möglicherweise mehr als eine Technik geeignet.
